TY - JOUR AU - Haghighi, Samaneh AU - Haghighi, Arezoo AU - Zádori, Zoltán Sándor AU - Kovács, Krisztián AU - Manzéger, Anna AU - Kökény, Gábor TI - Celecoxib and naproxen disrupt autophagy and activate EGR1 in kidney tubules JF - EXPERIMENTAL AND MOLECULAR PATHOLOGY J2 - EXP MOL PATHOL VL - 144 PY - 2025 PG - 13 SN - 0014-4800 DO - 10.1016/j.yexmp.2025.105000 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/36361185 ID - 36361185 LA - English DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Gantsetseg, Garmaa AU - Manzéger, Anna AU - Haghighi, Samaneh AU - Kökény, Gábor TI - HK-2 cell response to TGF-β highly depends on cell culture medium formulations JF - HISTOCHEMISTRY AND CELL BIOLOGY J2 - HISTOCHEM CELL BIOL VL - 161 PY - 2024 IS - 1 SP - 69 EP - 79 PG - 11 SN - 0948-6143 DO - 10.1007/s00418-023-02237-x UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34155813 ID - 34155813 AB - The immortalized human renal proximal tubular epithelial cell line HK-2 is most commonly used to study renal cell physiology and human kidney diseases with tubulointerstitial fibrosis such as diabetic nephropathy, obstructive uropathy or allograft fibrosis. Epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) is the main pathological process of tubulointerstitial fibrosis in vitro. Transforming growth factor-beta (TGF-β) is a key inducer of EMT. Several pro-fibrotic gene expression differences have been observed in a TGF-β-induced EMT model of HK-2 cells. However, growth conditions and medium formulations might greatly impact these differences. We investigated gene and protein expression of HK-2 cells cultured in six medium formulations. TGF-β1 increased the expression of ACTA2, TGFB1, COL4A1, EGR2, VIM and CTGF genes while reducing PPARG in all medium formulations. Interestingly, TGF-β1 treatment either increased or decreased EGR1, FN, IL6 and C3 gene expression, depending on medium formulations. The cell morphology was slightly affected, but immunoblots revealed TGFB1 and vimentin protein overexpression in all media. However, fibronectin expression as well as the nuclear translocation of EGR1 was medium dependent. In conclusion, our study demonstrates that, using the HK-2 in vitro model of EMT, the meticulous selection of appropriate cell culture medium formulation is essential to achieve reliable scientific results. LA - English DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Révész, Csaba AU - Kökény, Gábor AU - Manzéger, Anna AU - Fazekas, Krisztina AU - Bocskai, Krisztián AU - Porogi, Anna AU - Hamar, Péter AU - Szénási, Gábor TI - A diszulfiram jelentősen csökkenti az akut ischemiás vesekárosodást egérben PY - 2024 SP - 5 PG - 1 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35067750 ID - 35067750 AB - Bevezetés A diszulfiram (DSF) az acetaldehid dehidrogenáz enzim gátlásával megakadályozza az acetaldehid lebomlást, ami alkohol fogyasztás után rosszullétet, acetaldehid-szindrómát okoz. A 40–es évek óta a gyógyszer számos egyéb hatását is felismerték, pl. a gyulladáscsökkentő hatást, amit a gasdermin D, egy gyulladásos komponens gátlása okoz. Jelen vizsgálatban a DSF hatását akut ischemiás vesekárosodásban teszteltük. Anyag és módszer A hím NMRI egereket ketaminnal és xilazinnal (80 mg/kg + 4 mg/kg, i.p.) elaltattuk, majd medián laparotomiát követően a bal veseartériát és vénát két okklúziós klippel 20 percre leszorítottuk. A jobb vesét a reperfúzió után eltávolítottuk, majd a sebzárást követően az állatokat metil-cellulózban szuszpenzált DSF-fel (100 mg/kg, i.p.) kezeltük. A kontroll (K) egerek metil-cellulózt kaptak. Mértük a vesefunkciót, szövettani feldolgozást végeztünk és a vesekárosodás, gyulladás, autofágia, fibrózis, gyulladás és a gyulladással kiváltott sejthalál (PCD) mRNS és fehérje markerek expresszióját immunhisztokémiával, qPCR-rel és Western blot-tal határoztuk meg. Eredmények A 20 perces ischemia és 24 órás reperfúzió minden vizsgálat paraméterben súlyos vesekárosodást mutató változásokat okozott. A DSF javította a vesefunkciót (karbamid-nitrogén (BUN); K: 91,5±2,7, DSF: 64,7±2,1 mg/dL) csökkentette a műtéti károsodást (plazma lipocalin-2 koncentráció; K: 16,4±1,0, DSF: 9,3±1,6 µg/mL), és a vesekárosodást, amit a vese lipocalin-2 mRNS és fehérje expresszió, a vesekárosodás molekula-1 (KIM-1) mRNS expresszió, valamint az akut tubuláris nekrózis jelentős csökkenése mutatott. A DSF mérsékelte a gyulladásos folyamatokat a vesében, mivel a tumor nekrózis faktor alfa (TNF-α), interleukin 6 (IL-6), komplement C3, az inflammaszóma komponens (NLRP3), a gasdermin D (GSDMD) mRNS expresszió, valamint a makrofág infiltráció sokkal alacsonyabb volt, mint a K állatok ischemiás károsodást szenvedett veséiben. A DSF kedvezően hatott a fibrotikus folyamatokra: nagymértékben csökkentette a transzformáló növekedési faktor béta1 (TGF-β1) fehérje és mRNS, valamint a mátrix metalloproteináz-szöveti inhibitor (TIMP1) mRNS expresszóját. A vegyes vonalú kináz domén szerű pszeudokináz (MLKL) kritikus szerepet játszik a TNF által kiváltott nekroptózisban, egy programozott sejthalál folyamatában, a receptorokkal kölcsönható fehérje 3 (RIP3) és az MLKL kölcsönhatásán keresztül. A RIP3 a nekroptózis útvonal kulcsfontosságú jelzőmolekulája. A DSF mindkét marker mRNS expresszióját a kontrollhoz közeli értékre csökkentette. Következtetés A diszulfiram védőhatása kivételesen erős ischemiás akut vesekárosodásban, és ebben a nekroptózis, a gyulladással kiváltott sejthalál gátlása egy most felismert új mechanizmus. LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Stepanova, Ganna AU - Manzéger, Anna AU - Mózes, Miklós AU - Kökény, Gábor TI - Renal Epithelial Complement C3 Expression Affects Kidney Fibrosis Progression JF - INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES J2 - INT J MOL SCI VL - 25 PY - 2024 IS - 23 PG - 24 SN - 1661-6596 DO - 10.3390/ijms252312551 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35596201 ID - 35596201 AB - Kidney fibrosis is a hallmark of chronic kidney diseases. Evidence shows that genetic variability and complement component 3 (C3) might influence tubulointerstitial fibrosis. Still, the role of renal C3 production in the epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) and genetically determined fibrosis progression remains undiscovered. The kidneys of fibrosis-resistant C57Bl/6J (B6) and fibrosis-prone CBA/J (CBA) and BALB/cJ (BalbC) mice (n = 4–8/group) were subjected to unilateral ureteral obstruction (UUO) and analyzed after 1, 3, and 7 days, along with human focal glomerular sclerotic (FSGS) and healthy kidneys. Mouse primary tubular epithelial cells (PTECs) were investigated after 24 h of treatment with transforming growth factor β (TGFβ) or complement anaphylatoxin 3a (C3a) agonist (n = 4/group). UUO resulted in delayed kidney injury in fibrosis-resistant B6 mice, but very early renal C3 messenger RNA (mRNA) induction in fibrosis-prone CBA and BalbC mice, along with collagen I (Col1a1) and collagen III (Col3a1). CBA depicted the fastest fibrosis progression with the highest C3, lipocalin-2 (Lcn2), Tgfb1, and chemokine (C-C motif) ligand 2 (Ccl2) expression. Human FSGS kidneys depicted C3 mRNA over-expression and strong tubular C3 immunostaining. In PTECs, C3a agonist treatment induced pro-fibrotic early growth response protein 1 (EGR1) expression and the EMT, independent of TGFβ signaling. We conclude that de novo renal tubular C3 synthesis is associated with the genetically determined kidney fibrosis progression rate in mice and the pathogenesis of FSGS in humans. This tubular C3 overproduction can, through local pro-fibrotic effects, influence the progression of chronic kidney disease. LA - English DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Mózes, Miklós AU - Gantsetseg, Garmaa AU - Manzéger, Anna AU - Kökény, Gábor TI - PIOGLITAZONE REVERSES MIR-130A AND MIR-199 DYSREGULATION INDUCED BY TGF-BETA DURING KIDNEY FIBROSIS JF - NEPHROLOGY DIALYSIS TRANSPLANTATION J2 - NEPHROL DIAL TRANSPL VL - 38 PY - 2023 IS - S1 EP - I477 PG - 2 SN - 0931-0509 DO - 10.1093/ndt/gfad063c_5503 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34007459 ID - 34007459 N1 - MTA Bolyai János Kutatási Ösztöndíj AB - Background and Aims: The peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ ) agonists have been shown to dampen TGF-β signaling and suppress miR-130a in VSMCs and also profibrotic miR-21-5p in the kidney. We have recently demonstrated that pioglitazone ameliorates established renal fibrosis by suppressing STAT3 and EGR1 [1], but its effect on renal miR-130a has not been investigated. Thus, we aimed to study how chronic oral pioglitazone treatment would affect TGF-β–driven renal miRNA dysregulation in mice. Method: Ten week old male C57Bl6 control (CTL, n = 6) and TGF-β transgenic mice (TGFb, n = 12, having elevated plasma TGF-β1 level) were used. CTL mice and half of TGFb mice received regular chow. The second half of transgenic mice received pioglitazone containing chow (dose: 20mg/kg/day) for 5 weeks (TGFb+Pio, n = 6), when the kidneys were evaluated. Results: Untreated TGFb mice had a 4.7-fold and 2.8-fold type I and type III collagen mRNA overexpression as compared to controls, respectively. This was accompanied by 3.8-fold pro-fibrotic Egr2 mRNA, 2.9-fold miR-130a, 3.9- fold miR-199 and 3.3-fold miR-21 overexpression. Chronic treatment with the PPARγ agonist pioglitazone reduced the expression of both collagen mRNAs and miRNAs miR-199 and miR-21 to control levels, but miR-130a reached even lower values than in control kidneys. Interestingly, the expression of miR-200a (regulated by TGF-beta and known to ameliorate fibrosis) was similar in all CTL and TGFb groups, regardless of treatment. Conclusion: Our data indicate that PPARγ agonist pioglitazone not only attenuates the TGF-β induced miR-21 overexpression, but also the renal dysregulation of miR-130a and miR-199, supporting its anti-fibrotic effects. LA - English DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Kökény, Gábor AU - Manzéger, Anna AU - Bencs, Rita AU - Mikóné, Fazekas Krisztina TI - Fibrotikus vesékben TGF-béta befolyásolja az autofágia aktivitását JF - HYPERTONIA ÉS NEPHROLOGIA J2 - HYPERTONIA NEPHROLOGIA VL - 27 PY - 2023 IS - Suppl. 1 SP - 32 EP - 33 PG - 2 SN - 1418-477X UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34156511 ID - 34156511 N1 - MTA Bolyai János Kutatói Ösztöndíj Támogatásával AB - Bevezetés: A vesében fokozott transzformáló növekedési faktor-béta (TGF-β) termelődés a vesefibrózis patogenezisének egyik motorja. Vesebetegségekben a megváltozott autofág aktivitás is szerepet játszhat a progresszióban, ezzel a sérült organellumok lebontása és a fehérjék újrahasznosítása csökkenhet. Az EGR1 egy TGF-β által is indukált pro-fibrotikus transzkripciós faktor, melynek fokozott aktivitása vesében növeli a kollagén szintézist, tüdőbetegségben pedig fokozta az autofág aktivitást. Ugyanakkor nem ismert, hogy vesefibrózisban van-e összefüggés az EGR1 és az autofág aktivitás között. Módszerek: Tizenöt hetes hím C57Bl6 kontroll (CTL, n=5) és TGF-β transzgenikus egereket (TGFb, n=5, megemelkedett TGF-β1 plazmaszinttel) hasonlítottunk össze. Altatás közben mértük az egerek artériás középnyomását (MAP) a.carotisba vezetett katéter segítségével, majd a veséket feldolgoztuk. Eredményeink (átlag+/-szórás) statisztikai összehasonlítását Mann-Whitney teszttel végeztük p<0.05 szignifikancia szint mellett. Eredmények: Nem találtunk eltérést vérnyomás értékekben (MAP CTL: 79±3; TGFb: 78±2 Hgmm). Ugyanakkor a TGFb vesékben jelentős tubulointerstíciális fibrózis illetve glomeruloszklerózis volt látható. Ezzel párhuzamosan TGFb vesékben szignifikánsan nőtt az EGR1 génexpresszió (CTL: 1.0±0.2; TGFb: 2.2±0.6) és fokozódott az autofágiában szerepet játszó p62 (SQSTM1) expressziója is (CTL: 1.0±0.1; TGFb: 1.4±0.3). Immunoblottal a p62 fehérje mennyiségének kétszeres növekedését találtuk TGFb vesékben (CTL: 1.0±0.2; TGFb: 2.2±0.2) melyet az LC3-II/LC3-I arány csökkenése kísért (CTL: 1.1±0.1; TGFb: 0.7±0.1). Immunfestéssel a CTL egerek veséiben minimális tubuláris és elenyésző glomeruláris p62 expressziót láttunk (0.24% pozitív terület). Ezzel szemben a TGFb vesékben markáns tubuláris p62 festődés mellett kismértékben fokozott glomeruláris pozitivitás is ábrázolódott (0.99% pozitív terület), mely az LC3 fényében az autofág aktivitás csökkenésére utal. Következtetés: TGF-béta transzgenikus modellünkben a vesékben jelentősen csökkent az autofág aktivitás, ezzel párhuzamosan magasabb EGR1 expressziót is mértünk. Ezek alapján feltételezzük, hogy a TGF-béta indukált EGR1 fokozódás vesefibrózisban befolyásolja a vese sejtek autofág aktivitását, mely a homeosztázis felborulása révén elősegítheti a fibrózis kialakulását. LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Manzéger, Anna AU - Gantsetseg, Garmaa AU - Mózes, Miklós AU - Hansmann, Georg AU - Kökény, Gábor TI - Pioglitazone Protects Tubular Epithelial Cells during Kidney Fibrosis by Attenuating miRNA Dysregulation and Autophagy Dysfunction Induced by TGF-β JF - INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES J2 - INT J MOL SCI VL - 24 PY - 2023 IS - 21 PG - 18 SN - 1661-6596 DO - 10.3390/ijms242115520 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34214262 ID - 34214262 N1 - MTA Bolyai Ösztöndíj BO/00304/20 AB - Excessive renal TGF-β production and pro-fibrotic miRNAs are important drivers of kidney fibrosis that lack any efficient treatment. Dysfunctional autophagy might play an important role in the pathogenesis. We aimed to study the yet unknown effects of peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) agonist pioglitazone (Pio) on renal autophagy and miRNA dysregulation during fibrosis. Mouse primary tubular epithelial cells (PTEC) were isolated, pre-treated with 5 µM pioglitazone, and then stimulated with 10 ng/mL TGF-β1 for 24 h. Male 10-week-old C57Bl6 control (CTL) and TGF-β overexpressing mice were fed with regular chow (TGF) or Pio-containing chow (20 mg/kg/day) for 5 weeks (TGF + Pio). PTEC and kidneys were evaluated for mRNA and protein expression. In PTEC, pioglitazone attenuated (p < 0.05) the TGF-β-induced up-regulation of Col1a1 (1.4-fold), Tgfb1 (2.2-fold), Ctgf (1.5-fold), Egr2 (2.5-fold) mRNAs, miR-130a (1.6-fold), and miR-199a (1.5-fold), inhibited epithelial-to-mesenchymal transition, and rescued autophagy function. In TGF mice, pioglitazone greatly improved kidney fibrosis and related dysfunctional autophagy (increased LC3-II/I ratio and reduced SQSTM1 protein content (p < 0.05)). These were accompanied by 5-fold, 3-fold, 12-fold, and 2-fold suppression (p < 0.05) of renal Ccl2, Il6, C3, and Lgals3 mRNA expression, respectively. Our results implicate that pioglitazone counteracts multiple pro-fibrotic processes in the kidney, including autophagy dysfunction and miRNA dysregulation. LA - English DB - MTMT ER - TY - THES AU - Manzéger, Anna TI - Stressz-indukált autofágia szabályozási mechanizmusai Drosophila melanogasterben PB - Eötvös Loránd Tudományegyetem (ELTE) PY - 2023 SP - 107 DO - 10.15476/ELTE.2022.245 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34785859 ID - 34785859 LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Kökény, Gábor AU - Németh, Ágnes AU - Kopp, Jeffrey B. AU - Chen, Weiping AU - Oler, Andrew J. AU - Manzéger, Anna AU - Rosivall, László AU - Mózes, Miklós TI - Susceptibility to kidney fibrosis in mice is associated with early growth response-2 protein and tissue inhibitor of metaloproteinase-1 expression JF - KIDNEY INTERNATIONAL J2 - KIDNEY INT VL - 102 PY - 2022 IS - 2 SP - 337 EP - 354 PG - 18 SN - 0085-2538 DO - 10.1016/j.kint.2022.03.029 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/32804552 ID - 32804552 N1 - MTA Bolyai János Kutatási Ösztöndíj AB - Patients with chronic kidney disease and experimental animal models of kidney fibrosis manifest diverse progression rates. Genetic susceptibility may contribute to this diversity, but the causes remain largely unknown. We have previously described kidney fibrosis with a mild or severe phenotype in mice expressing transforming growth factor-beta1 (TGF-β1) under the control of a mouse albumin promoter (Alb/TGFβ1), on a mixed genetic background with CBAxC57Bl6 mice. Here, we aimed to examine how genetic background may influence kidney fibrosis in TGF-β1 transgenic mice, and in the unilateral ureteral obstruction (UUO) and subtotal nephrectomy (SNX) mouse models. Congenic C57Bl6(B6)-TGFβ and CBAxB6-TGFβ (F1) transgenic mice were generated and survival, proteinuria, kidney histology, transcriptome and protein expressions were analyzed. We investigated the kidneys of B6 and CBA mice subjected to UUO and SNX, and the effects of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 (TIMP-1) neutralization on the fibrotic process. CBAxB6-TGFβ mice developed severe kidney fibrosis and premature death, while B6-TGF-β mice had mild fibrosis and prolonged survival. Kidney early growth response factor-2 (EGR2) and TIMP-1 expression were induced only in CBAxB6-TGFβ mice. Similar strain-dependent early changes in EGR2 and TIMP-1 of mice subjected to UUO or SNX were observed. TIMP-1 neutralization in vivo hindered fibrosis both in transgenic mice and the SNX model. EGR2 over-expression in cultured HEK293 cells induced TIMP-1 while EGR2 silencing hindered TGF-β induced TIMP-1 production in HK-2 cells and ureteral obstructed kidneys. Finally, EGR2 and TIMP1 was increased in human kidneys manifesting focal segmental glomerulosclerosis suggesting a correlation between animal studies and patient clinical settings. Thus, our observations demonstrate a strong relationship between genetic background and the progression of kidney fibrosis, which might involve early altered EGR2 and TIMP-1 response, but the relationship to patient genetics remains to be explored. LA - English DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Manzéger, Anna AU - Mikone, Krisztina AU - Mózes, Miklós AU - Kökény, Gábor TI - MO404: Autophagy and Fibrotic Response is Genetically Determined in Mouse Mesangial Cells JF - NEPHROLOGY DIALYSIS TRANSPLANTATION J2 - NEPHROL DIAL TRANSPL VL - 37 PY - 2022 IS - Supplement_3 SN - 0931-0509 DO - 10.1093/ndt/gfac070.018 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/33034297 ID - 33034297 N1 - MTA Bolyai János Kutatási Ösztöndíj LA - English DB - MTMT ER -