TY - JOUR AU - Saqib, Ahmed AU - Kovács, Dániel AU - Kovács, Márton AU - Kosztelnik, Mónika AU - Hotzi, Bernadette AU - Kovácsné Sigmond, Tímea Ilona AU - Saskői, Éva AU - Vincze, Viktor Vázsony AU - Erdélyi, Viktor AU - Deák, Veronika AU - Stiller, Ibolya AU - Vellai, Tibor AU - Barna, János TI - Heat shock factor-1 alleviates ER-stress in Caenorhabditis elegans JF - SCIENTIFIC REPORTS J2 - SCI REP VL - 16 PY - 2026 IS - 1 PG - 13 SN - 2045-2322 DO - 10.1038/s41598-026-43060-3 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/37063716 ID - 37063716 AB - Cells can be exposed to many different stimuli that induce a variety of stresses, such as oxidative stress and proteotoxic stress of the cytoplasm, endoplasmic reticulum or mitochondria. These types of stresses trigger conserved molecular pathways (e.g., heat shock response, unfolded protein response, and autophagy) that can restore cellular homeostasis. Dysfunction (deficiency or hyperactivity) of these pathways is associated with aging and pathologies such as neurodegenerative diseases, diabetes and cancer. The basic molecular machinery of these stress response pathways has been elucidated, but how these pathways interact remains a vibrant area of research. Here, we show that the heat shock transcription factor-1 (HSF-1), the master regulator of the heat shock response, is required for efficient activation of the endoplasmic reticulum unfolded protein response (UPR ER ) in the nematode Caenorhabditis elegans . Tolerance against tunicamycin-induced ER stress also requires HSF-1 activity. We found that mRNA levels of several genes involved in the UPR ER are regulated by HSF1 in human cell lines. These results suggest that HSF-1 plays a critical role in the cellular response to ER stress. LA - English DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Babay, Imre AU - Kerkovits, Nóra Melinda AU - Tóth, Csillag Virág AU - Kosztelnik, Mónika AU - Benyó, Zoltán TI - IFI-05 A krónikus angiotenzin II kezelés hatása a C3a által kiváltott vazokonstrikcióra PY - 2024 SP - 124 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35067784 ID - 35067784 AB - Bevezetés Korábbi kutatásaink alapján azt feltételeztük, hogy a C3a anafilatoxin vazokonstriktor hatásának közvetítéséért az adventitiális makrofágok felelősek, a rajtuk kifejeződő C3a receptorok (C3aR) révén. Jelen kísérleteinkben arra kerestünk választ, hogy a makrofág felszaporodással járó szisztémás gyulladásos állapot hogyan befolyásolja a C3a-mediált vazokonstriktor hatást. Anyag és módszer Felnőtt hím C57Bl/6 vad típusú egerek torakális és abdominális aorta szegmentjeit vizsgáltuk izometriás körülmények között miográffal. Az állatok 14 napig részesültek angiotenzin II (AngII) (520 ng/ttkg/min) vagy fiziológiás sóoldat kezelésben subcutan beültetett ozmotikus pumpák segítségével. A kontrakció gátlására indomethacint és SQ29548-at használtunk. A C3AR1, valamint az F4/80 és CD68 makrofágmarkerek expresszióját qPCR-ral határoztuk meg intakt erekben, illetve az adventitia és az intima-media réteg szétválasztását követően. Immunhisztokémiai módszerekkel vizsgáltuk a C3aR-ok lokalizációját, míg a C3AR1 fehérje mennyiségét Western-blot segítségével kvantifikáltuk. Eredmények Az AngII infúzió hatására a C3a által kiváltott vazokonstriktor válasz szignifikánsan felerősödött. qPCR analízisünk kimutatta, hogy AngII kezelés hatására jelentősen megnőtt a C3AR1 és az F4/80 mRNS szintű expressziója az aortafalban. Az adventitiát és a mediát külön vizsgálva megfigyeltük, hogy a vizsgált markerek expressziójának növekedése az adventitiában összpontosul. Az endothelirtás fokozta, míg az adventitia eltávolítása gyakorlatilag megszüntette a C3a által kiváltott vazokonstrikciót. Emellett a ciklooxigenáz (COX) és a tromboxán-prosztanoid (TP) receptor inhibitorai is meggátolták a C3a által kiváltott érválaszt. Következtetés Eredményeink szerint az AngII kezelés által kiváltott szisztémás gyulladás a C3a-mediált vazokonstriktor hatás felerősödéséhez vezet. Az expressziós adatok és a mechanizmus vizsgálata alapján arra következtethetünk, hogy a C3a vazokonstriktor hatását az adventitiális makrofágok okozzák, amelyet a belőlük felszabaduló tromboxán A2 közvetít. A C3arR vagy TP receptorok célzása ígéretes terápiás stratégiának tűnik a vaszkuláris diszfunkció enyhítésére szisztémás gyulladásos betegségekben. LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Janovicz, Anna AU - Besztercei, Balázs AU - Kosztelnik, Mónika AU - Vén, Krisztina Eszter AU - Tigyi, Gabor AU - Benyó, Zoltán AU - Ruisanchez, Éva TI - IFI-12 A tunica adventitia szerepe a lizofoszfatidsav okozta vazokonstrikció kialakulásában PY - 2024 SP - 131 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35067853 ID - 35067853 AB - Bevezetés Korábbi publikációink alapján a lizofoszfatidsav (LPA) jelentős hatással van az értónusra. Egér mellkasi aortában az LPA ép endotélium jelenlétében vazorelaxációt, míg károsodott endotélium esetén vazokonstrikciót okoz, mely utóbbit tromboxán A2 felszabadulás közvetíti. Az LPA értónus hatásai eredményeink szerint az LPA1 receptorok aktivációján keresztül valósulnak meg. Jelen vizsgálatban arra voltunk kíváncsiak, milyen intracelluláris jelátviteli utak közvetítik az LPA vazokonstriktor hatását az aorta simaizomsejtekben. Anyag és módszer Felnőtt hím egerek mellkasi aortáját transzkardiális perfúziót követően izoláltuk. Az aortát megtisztítottuk, majd a kísérletek jelentős részében az adventitia réteget mechanikusan elválasztottuk a media rétegtől, az intimát pedig fonallal irtottuk. Az így kapott szövetek egy részéből adventitia illetve simaizom primer sejtkultúrát hoztunk létre, egy részében pedig qPCR mérést végeztünk. További szétválasztott adventitia, media, valamint épen hagyott aorta mintákban izometriás feszülést mértünk miográf módszerrel, intracelluláris kalcium mérést végeztünk ratiometriás módszerrel, illetve tromboxán felszabadulást mértünk ELISA segítségével. Eredmények Mivel elsődlegesen arra voltunk kíváncsiak, milyen jelátviteli utakat aktivál az LPA a simaizom sejtekben, így kalcium-mérést végeztünk izolált aorta simaizom sejteken, illetve adventitia irtott simaizom gyűrűkben erőméréssel egybekötve. Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy az LPA nem tud sem kalcium-szignált, sem kontrakciót kiváltani, miközben a simaizomsejtek válaszkészsége ATP-re, illetve a simaizom gyűrűk tromboxán receptor agonista U46619-re megtartott maradt. Mivel az aorta rétegei közül az adventitia mutatta a legnagyobb Lpar1 expressziót, ezért megvizsgáltuk, az adventitia réteg hiánya okozta-e az LPA hatásának elmaradását. Mind adventitia sejtkultúrán, mind adventitia gyűrűkön az LPA kezelés kalcium-szignált váltott ki, valamint adventitia jelenlétében az érgyűrűk LPA hatására mutattak kalcium-jelet és kontraháltak. A simaizom gyűrűkben LPA kezelés hatására nem jött létre tromboxán A2 felszabadulás, míg adventitia preparátumban igen. Következtetés Az LPA vazokonstriktor hatását az adventita LPA1 receptorok aktivációja és az onnan felszabaduló tromboxán A2 közvetíti, miközben az LPA közvetlen hatása az aorta simaizomrétegben elhanyagolható. Az LPA okozta érösszehúzódás eredményeink szerint egy adventitiából induló, ún. „outside-in” parakrin hatás, aminek szerepe lehet az adventitia aktivációjával járó állapotokban. LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Tóth, Csillag Virág AU - Kerkovits, Nóra Melinda AU - Kerék, Margit AU - Babay, Imre AU - Nagy, Dorina AU - Pál, Éva AU - Kosztelnik, Mónika AU - Benyó, Zoltán TI - IFI-17 D-vitamin hiány életkorfüggő hatásai az érreaktivitásra PY - 2024 SP - 136 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35067869 ID - 35067869 AB - Bevezetés Az európai lakosság megközelítőleg 40%-a szenved D-vitamin hiányban, melynek prevalenciája az életkor előrehaladtával nő. Az elmúlt évek során számos kutatás bizonyította, hogy D-vitamin hiány esetén romlik a kardiovaszkuláris rendszer állapota, többek között az erek funkciója is, azonban ennek pontos pathomechanizmusát – főleg idősebb életkorban - még nem teljesen azonosították. Célkitűzés Célunk a D-vitamin hiány vaszkuláris hatásainak vizsgálata volt fiatal és idősebb egerekben, valamint az érreaktivitás megváltozásában szerepet játszó molekuláris és celluláris mechanizmusok azonosítása. Módszerek Vad típusú (WT) és D-vitamin receptor géndeficiens (VDR KO) fiatal és idős (3 és 11 hónapos) hím egerekből izolált torakális aortaszegmenseket vizsgáltunk izometriás körülmények között miográfon. A fenilefrinre adott érválaszokat 124 mM K+ indukálta kontrakcióra, az acetilkolin-okozta endothelium-függő relaxációt pedig fenilefrinnel kiváltott prekontrakcióra normalizáltuk. Ezen túl a miográffal vizsgált érszegmensekből meghatároztuk a relaxációban szerepet játszó M3 muszkarinerg receptor (CHRM3), endotheliális nitrogén monoxid NO szintáz (NOS3), szolubilis gianilát cikláz (GUCY1A1 és GUCY1B1), illetve az erek adventitiájában található makrofágok markerének (F4/80) expressziós szintjeit qPCR analízissel. A kísérleteink ezt követő szakaszában megmértük a glutation-peroxidáz 1 (GPX1) és a kataláz (CAT) enzimek génexpresszióját is. Eredmények Míg a fenilefrinre adott kontrakciók között nem tapasztaltunk különbségeket, addig az acetilkolin relaxáló hatása szignifikánsan csökkent idős VDR KO egerek aortája esetén a fiatal WT, fiatal KO és idős WT erekhez képest (27,5; 25,7 ill. 20,7%-kal). A CHRM3, NOS3 expressziójában nem tapasztaltunk szignifikáns eltéréseket a kísérleti csoportok között, azonban az idősebb állatokban D-vitamin státusztól függetlenül magasabb volt az F4/80 mRNS szintje. A GPX1 és CAT génexpressziók szignifikánsan lecsökkentek idős erekben. A makrofág marker expressziója és az acetilkolin-indukálta relaxáció között negatív korreláció áll fent (r=-0,2955, p<0,0106). Következtetések Eredményeink alapján a D-vitamin hiány idősebb életkorban károsítja az erek endothelium-függő relaxációs képességét. Ennek hátterében nem az NO termelés zavara, hanem feltehetőleg az erek adventitiájában levő makrofágok által termelt reaktív oxigén szabadgyökök állnak, melyek reagálnak a képződött NO-val, ezzel csökkentve annak dilatációs képességét. Ezek alapján arra következtethetünk, hogy D-vitamin hiányban egy proinflammatorikus állapot jön létre, ami idős korban súlyosbodik és a kialakuló endotheliális diszfunkció növelheti a kardiovaszkuláris betegségek kialakulásának kockázatát. LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Balla, Helga AU - Borsodi, Kinga AU - Őrsy, Petra AU - Horváth, Béla AU - Molnár, Péter József AU - Lénárt, Ádám AU - Kosztelnik, Mónika AU - Ruisanchez, Éva AU - Stefan, Offermans AU - Benyó, Zoltán TI - A Rho-Rho kináz (ROCK) jelátviteli útvonal szerepe egér húgyhólyag simaizomban PY - 2024 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/35907422 ID - 35907422 LA - Hungarian DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Balla, Helga AU - Borsodi, Kinga AU - Őrsy, Petra AU - Horváth, Béla András AU - Molnár, Péter József AU - Lénárt, Ádám AU - Kosztelnik, Mónika AU - Ruisanchez, Éva AU - Wess, Jürgen AU - Offermanns, Stefan AU - Nyirády, Péter AU - Benyó, Zoltán TI - Intracellular signaling pathways of muscarinic acetylcholine receptor-mediated detrusor muscle contractions JF - AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY: RENAL PHYSIOLOGY J2 - AM J PHYSIOL RENAL VL - 325 PY - 2023 IS - 5 SP - F618 EP - F628 PG - 11 SN - 1931-857X DO - 10.1152/ajprenal.00261.2022 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34148693 ID - 34148693 LA - English DB - MTMT ER - TY - JOUR AU - Janovicz, Anna AU - Majer, Aliz AU - Kosztelnik, Mónika AU - Geiszt, Miklós AU - Chun, Jerold AU - Ishii, Satoshi AU - Tigyi, Gabor AU - Benyó, Zoltán AU - Ruisanchez, Éva TI - Autotaxin–lysophosphatidic acid receptor 5 axis evokes endothelial dysfunction via reactive oxygen species signaling JF - EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE J2 - EXP BIOL MED VL - 248 PY - 2023 IS - 20 SP - 1887 EP - 1894 PG - 8 SN - 1535-3702 DO - 10.1177/15353702231199081 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34213267 ID - 34213267 AB - Lysophosphatidylcholine (LPC) is a bioactive lipid that has been shown to attenuate endothelium-dependent vasorelaxation contributing to endothelial dysfunction; however, the underlying mechanisms are not well understood. In this study, we investigated the molecular mechanisms involved in the development of LPC-evoked impairment of endothelium-dependent vasorelaxation. In aortic rings isolated from wild-type (WT) mice, a 20-min exposure to LPC significantly reduced the acetylcholine chloride (ACh)–induced vasorelaxation indicating the impairment of normal endothelial function. Interestingly, pharmacological inhibition of autotaxin (ATX) by GLPG1690 partially reversed the endothelial dysfunction, suggesting that lysophosphatidic acid (LPA) derived from LPC may be involved in the effect. Therefore, the effect of LPC was also tested in aortic rings isolated from different LPA receptor knock-out (KO) mice. LPC evoked a marked reduction in ACh-dependent vasorelaxation in Lpar1, Lpar2, and Lpar4 KO, but its effect was significantly attenuated in Lpar5 KO vessels. Furthermore, addition of superoxide dismutase reduced the LPC-induced endothelial dysfunction in WT but not in the Lpar5 KO mice. In addition, LPC increased H 2 O 2 release from WT vessels, which was significantly reduced in Lpar5 KO vessels. Our findings indicate that the ATX–LPA–LPA 5 receptor axis is involved in the development of LPC-induced impairment of endothelium-dependent vasorelaxation via LPA 5 receptor–mediated reactive oxygen species production. Taken together, in this study, we identified a new pathway contributing to the development of LPC-induced endothelial dysfunction. LA - English DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Vén, Krisztina Eszter AU - Besztercei, Balázs AU - Kosztelnik, Mónika AU - Tigyi, Gabor AU - Benyó, Zoltán AU - Ruisanchez, Éva TI - THE ADVENTITIAL LAYER PLAYS A CRUCIAL ROLE IN THE SIGNAL TRANSDUCTION OF VASOCONSTRICTION INDUCED BY 18:2 LYSOPHOSPHATIDIC ACID PY - 2023 SP - 179 EP - 179 PG - 1 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34747645 ID - 34747645 AB - Lysophosphatidic acid (LPA) is a bioactive lipid mediator, which exerts its effects via its six specific GPCRs mediating important physiological and pathophysiological responses, like platelet activation or cell-migration. During vascular injury or rupture of an atherosclerotic plaque, the consequential platelet activation leads to the release of mainly polyunsaturated LPAs, especially 18:2 LPA. In hypertension and acute myocardial infarction, the level of these polyunsaturated LPAs is also elevated. Based on the previous results of our research group, LPA1 receptor activation by the 18:2 LPA evokes cyclooxygenase 1 activation with consequential thromboxane A2 (TXA2) release, and vasoconstriction. In this study we further analyzed the signaling mechanisms underlying the constrictor effect of 18:2 LPA. We did experiments in aortas isolated from Bl6 mice. Our main method was the measurement of the vascular tone with myography. The endothelium, and in some cases the adventitia as well, was mechanically removed and the 18:2 LPA was administered on the resting tone. TXA2 release of the vessels was measured by ELISA. Primary vascular cells were isolated from different layers of the aorta and their intracellular Ca2+ signal upon LPA administration was determined. qPCR was used to measure the expression of the LPA1 receptor in the lamina media and adventitia. According to our results, removal of the adventitia significantly decreases the elicited vasoconstriction, and results in a complete loss of thromboxane release. In agreement with this, LPA1 receptor is predominantly expressed in the adventitial layer, as removal of the adventitia resulted in diminished expression of Lpar1. Staining of the LPA1 receptor was only present in the adventitial layer, but not in the lamina media. Primary isolated vascular smooth muscle cells exhibited negligible Ca2+ signal upon administration of 18:2 LPA, however a subpopulation of adventitial cells showed marked intracellular Ca2+ increase when stimulated by 18:2 LPA. In conclusion, LPA 18:2 has strong vasoconstrictor activity, due to its ability to increase LPAR1–Gi–COX mediated thromboxane release from the adventitia, highlighting the significance of this layer in the regulation of vasomotion. LA - English DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Tóth, Csillag Virág AU - Kerkovits, Nóra Melinda AU - Kerék, Margit AU - Babay, Imre AU - Nagy, Dorina AU - Pál, Éva AU - Kosztelnik, Mónika AU - Benyó, Zoltán TI - VITAMIN D DEFICIENCY ASSOCIATED WITH AGE-DEPENDENT VASCULAR DYSFUNCTION IN MICE PY - 2023 SP - 184 EP - 184 PG - 1 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34747660 ID - 34747660 AB - Introduction: Approximately 40% of the European population is vitamin D deficient, and the prevalence increases with age. In recent years, several studies have demonstrated that vitamin D deficiency leads to a deterioration of the cardiovascular system, including vascular function, but the precise pathomechanism of this decline, particularly in the elderly, is not fully understood. Aim: We aimed to investigate the vascular effects of vitamin D deficiency in young and aged mice and to identify the molecular and cellular mechanisms involved in the alteration of vascular reactivity. Methods: Segments of the thoracic aorta isolated from wild-type (WT) and vitamin D receptor gene deficient (VDR KO) young and aged (3 and 11 months) male mice were examined under isometric conditions using myograph. The vascular responses to phenylephrine were normalized to 124 mM K+ -induced contraction, and acetylcholineinduced endothelium-dependent relaxation was normalized to the pre-contraction induced by phenylephrine. In addition, we determined the expression levels of relaxation-associated M3 muscarinic receptor (Chrm3), endothelial nitric oxide NO synthase (Nos3), soluble guanylate cyclase (Gucy1a1 and Gucy1b1) and adventitial macrophage marker (F4/80) genes from myographically studied vessel segments. The presence of the macrophages was examined using immunhistochemistry. Results: While no differences were observed between contractions to phenylephrine, the relaxant effect of acetylcholine was significantly reduced in aortas of aged VDR KO mice compared to young WT, young KO and aged WT vessels (with 27.5; 25.7 and 25.7 %). No significant differences were observed in the expression of Chrm3, Nos3, Gucy1a1 and Gucy1b1 genes between experimental groups, but VDR deficient animals had higher levels of F4/80 mRNA regardless of age. There was a negative correlation between the expression of macrophage marker and the relaxation induced by acetylcholine (r=-0.2955, p<0.0106). Conclusion: Our results suggest that vitamin D deficiency impairs endotheliumdependent relaxation of blood vessels in older age. This is not due to impaired NO production or smooth muscle signalling, but is probably due to reactive oxygen free radicals produced by macrophages in the vascular adventitia, which react with the NO produced, thereby reducing its dilator capacity. These findings suggest that vitamin D deficiency induces a proinflammatory state with increased myeloid infiltration in the vascular wall, which is exacerbated with age. The resulting endothelial dysfunction may increase the risk of developing cardiovascular disease. LA - English DB - MTMT ER - TY - GEN AU - Babay, Imre AU - Kerkovits, Nóra Melinda AU - Tóth, Csillag Virág AU - Szénási, Gábor AU - Kosztelnik, Mónika AU - Benyó, Zoltán TI - SYSTEMIC INFLAMMATION INDUCED BY ANGIOTENSIN II INCREASES C3a-MEDIATED VASOCONSTRICTION IN MICE PY - 2023 SP - 189 EP - 189 PG - 1 UR - https://m2.mtmt.hu/api/publication/34747676 ID - 34747676 AB - Introduc�on: Cardiovascular diseases are known to be associated with ac�va�on of the complement system, however, the precise rela�onship between the two processes is partly unclear. The complement component C3a receptor (C3aR) has been iden�fied in various cell types within the mouse arterial wall and the vasoconstrictor effect of C3a may be mediated by resident macrophages in the adven��a via thromboxane A2 (TXA2) release, as found by our workgroup in previous research. Aims: The primary objec�ve of this study was to determine the effects of chronic angiotensin II (Ang II) administra�on on C3a-induced vasoconstric�on in mice, along with demonstra�ng the presence of macrophages in the adven��a using alterna�ve methods. Methods: Changes in the isometric tension of the vascular segments were measured using myography a�er isola�ng thoracic and abdominal aor�c segments of adult male C57BL/6 mice. The mice were infused with either Ang II (520 ng/kg/min) or saline for 14 days via microosmo�c pumps implanted in the subscapular region. qPCR assays were performed to measure the expression level of C3aR and the mouse macrophage marker F4/80. The expression of other genes involved in the signaling pathway, such as Cyclooxygenase 1 and 2 (Cox1 and Cox2), thromboxane A synthase 1 (Tbxas1), and thromboxane A2 receptor (Tbxa2r), were inves�gated. The localiza�on of C3AR1 was confirmed using immunohistochemistry. The mechanism of the contrac�on was examined using the cyclooxygenase (COX) inhibitor indomethacin and SQ29548, a thromboxane prostanoid (TP) receptor antagonist. Results: An increased response to C3a (63–77) was observed in the vascular segments due to the increased expression of C3aR caused by Ang II treatment compared to controls that received saline infusion. The qPCR results revealed an increase in the expression of F4/80 and C3aR in the aortas, par�cularly in the adven��a, due to Ang II infusion. A�er removing the endothelium, the vasoconstric�on increased, while the vessels became unresponsive to C3a a�er the administra�on of COX and TP receptor inhibitors and the removal of the adven��a. Conclusion: It can be concluded from our results that chronic Ang II administra�on can lead to an enhanced vasoconstrictor response to C3a and an increased expression of C3aR in the aor�c wall, par�cularly in the adven��a where macrophages accumulate. Our findings propose that the vasoconstric�on induced by C3a in the mouse aorta is facilitated by macrophages that have gathered in the adven��a. During the development of various cardiovascular diseases, the effects of anaphylatoxins could be amplified and may contribute to the progression of the diseases LA - English DB - MTMT ER -