Bevezetés
A diszulfiram (DSF) az acetaldehid dehidrogenáz enzim gátlásával megakadályozza az
acetaldehid
lebomlást, ami alkohol fogyasztás után rosszullétet, acetaldehid-szindrómát okoz.
A 40–es évek óta
a gyógyszer számos egyéb hatását is felismerték, pl. a gyulladáscsökkentő hatást,
amit a gasdermin
D, egy gyulladásos komponens gátlása okoz. Jelen vizsgálatban a DSF hatását akut ischemiás
vesekárosodásban teszteltük.
Anyag és módszer
A hím NMRI egereket ketaminnal és xilazinnal (80 mg/kg + 4 mg/kg, i.p.) elaltattuk,
majd medián
laparotomiát követően a bal veseartériát és vénát két okklúziós klippel 20 percre
leszorítottuk. A jobb
vesét a reperfúzió után eltávolítottuk, majd a sebzárást követően az állatokat metil-cellulózban
szuszpenzált DSF-fel (100 mg/kg, i.p.) kezeltük. A kontroll (K) egerek metil-cellulózt
kaptak. Mértük
a vesefunkciót, szövettani feldolgozást végeztünk és a vesekárosodás, gyulladás, autofágia,
fibrózis, gyulladás és a gyulladással kiváltott sejthalál (PCD) mRNS és fehérje markerek
expresszióját immunhisztokémiával, qPCR-rel és Western blot-tal határoztuk meg.
Eredmények
A 20 perces ischemia és 24 órás reperfúzió minden vizsgálat paraméterben súlyos vesekárosodást
mutató változásokat okozott. A DSF javította a vesefunkciót (karbamid-nitrogén (BUN);
K: 91,5±2,7,
DSF: 64,7±2,1 mg/dL) csökkentette a műtéti károsodást (plazma lipocalin-2 koncentráció;
K:
16,4±1,0, DSF: 9,3±1,6 µg/mL), és a vesekárosodást, amit a vese lipocalin-2 mRNS és
fehérje
expresszió, a vesekárosodás molekula-1 (KIM-1) mRNS expresszió, valamint az akut tubuláris
nekrózis jelentős csökkenése mutatott. A DSF mérsékelte a gyulladásos folyamatokat
a vesében,
mivel a tumor nekrózis faktor alfa (TNF-α), interleukin 6 (IL-6), komplement C3, az
inflammaszóma
komponens (NLRP3), a gasdermin D (GSDMD) mRNS expresszió, valamint a makrofág infiltráció
sokkal alacsonyabb volt, mint a K állatok ischemiás károsodást szenvedett veséiben.
A DSF
kedvezően hatott a fibrotikus folyamatokra: nagymértékben csökkentette a transzformáló
növekedési faktor béta1 (TGF-β1) fehérje és mRNS, valamint a mátrix metalloproteináz-szöveti
inhibitor (TIMP1) mRNS expresszóját. A vegyes vonalú kináz domén szerű pszeudokináz
(MLKL)
kritikus szerepet játszik a TNF által kiváltott nekroptózisban, egy programozott sejthalál
folyamatában, a receptorokkal kölcsönható fehérje 3 (RIP3) és az MLKL kölcsönhatásán
keresztül.
A RIP3 a nekroptózis útvonal kulcsfontosságú jelzőmolekulája. A DSF mindkét marker
mRNS
expresszióját a kontrollhoz közeli értékre csökkentette.
Következtetés
A diszulfiram védőhatása kivételesen erős ischemiás akut vesekárosodásban, és ebben
a
nekroptózis, a gyulladással kiváltott sejthalál gátlása egy most felismert új mechanizmus.
